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乳糖发酵实验

发表时间:2018-12-28  |  点击率:1269

使用恒温培养箱进行乳糖发酵实验

乳糖发酵( Lactose Fermentation Experiment ) 是常用的鉴别微生物的生化反应,在肠道细菌的鉴定上尤为重要,是初步鉴定肠道致病菌与非致病菌常用的试验。应用于食品,环境行业比较多.下面小编给大家介绍一下乳糖检测的实验方法,供大家参考

一、乳糖发酵实验

1、取10ml水样接种到10ml双料乳糖蛋白胨培养液中,取1ml水样接种到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中,另取1ml水样注入到9ml灭菌生理盐水中,混匀后吸取1ml(即0.1ml水样)注入到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中,每一稀释度接种5管。对已处理过的出厂自来水,需经常检验或每天检验一次的,可直接种5份10ml水样双料培养基,每份接种10ml水样。

2、检验水源水时,如污染较严重,应加大稀释度,可接种1,0.1,0.01ml甚至0.1,0.01,0.001ml,每个稀释度接种5管,每个水样共15管。接种1ml以下水样时必须作10倍递增稀释后,取1ml接种,每递增稀释一次,换用1支1ml灭菌刻度吸管。

3、将接种管置36±10℃恒温培养箱内,培养24h±2h,如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸,则可报告为总大肠菌群阴性,如有产酸产气者,则按下列步骤进行。

二、分离培养:经培养24h后,将产酸产气的发酵管,分别接种于伊红美蓝平板上,36±10℃愠温培养8h-24h,观察形态,挑取数个可疑菌落进行涂片、革兰氏染色、镜检。

三、证实试验:挑取可疑管接种乳糖蛋白胨培养液中,置于36±10℃恒温培养箱中培养24h±2h,有产酸产气者,即证实有总大肠菌群存在。

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