用二氧化碳培养箱做海马神经元细胞分离培养

海马神经元细胞分离培养实验1、仪器二氧化碳培养箱，解剖镜，眼科镊，眼科剪2、动物新生鼠（SD大鼠）3、耗材DMEM/F12培养基、聚赖氨酸实验步骤：包被：培养前一天将培养板或培养瓶或皿用0.01%多聚赖氨酸包被过夜。第二天早上来吸除包被液在无菌超净台中自然晾干后放置于二氧化碳培养箱中备用。配制神经元专用培养基（DMEM/F12培养基中添加1%谷氨酰胺，2%B27，1%双抗）取脑：选取新生24h之内的SD大鼠数只,雌雄不限,75%酒精全身消毒,断头处死,无菌条件下分层剪开头皮,...

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小量质粒DNA的提取之碱裂解法

此方法适用于小量质粒DNA的提取，提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下：1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2mlLB培养基2、37℃振荡培养箱过夜3、取1.5ml菌体于Ep管，以4000rpm离心3min，弃上清液4、加0.lml溶液I(1％葡萄糖，50mM/LEDTApH8.0，25mM/LTris-HClpH8.0)充分混合5、加入0.2ml溶液II(0.2mM/LNaOH，1％SDS)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5min6、加入0.15ml预冷溶...

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真空干燥箱做三聚氰胺实验

三聚氰胺（C3H6N6）是一种有机化合物，因其化学结构中含有三个氰基（-CN）而得名。在实验中使用真空干燥箱进行三聚氰胺实验，可能是为了在低压环境下除去三聚氰胺样品中的水分，以获得干燥的样品。以下是一个简化的实验步骤，但请注意，具体实验操作应遵循实验室安全规范和化学品操作指南。实验步骤：准备：确保实验室通风良好，穿戴适当的个人防护装备，如实验服、手套、护目镜等。称量：准确称取一定量（根据实验需要确定）的三聚氰胺样品。装样：将称量好的三聚氰胺样品放入干燥的试管或者称量瓶中。预干...

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一文了解箱式电阻炉的使用注意事项

箱式电阻炉是一种常见的电炉形式，分为立式，卧式，分体式，一体式。使用温度为1200度以下，1400度以下，1600度以下，1700度以下，分别以电阻丝、硅碳棒、硅钼棒为发热元件，根据需要可选择，箱式电炉除通常在空气中加热外，还有可通气氛和密封抽真空电炉，形式多样。广泛用于陶瓷、冶金、电子、玻璃、化工、机械、耐火材料、新材料开发、特种材料、建材等领域的生产及实验。箱式电阻炉使用注意事项：1.使用时炉膛温度不得超过额定炉温，也不要长时间工作在额定温度以上。2.工作环境条件为：温度...

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如何快速估算每次实验放几只动物？

动物实验设计应遵循实行“3R原则”，包括实验动物的替代、减少和优化原则，其中减少即指尽量减少实验动物的数量。查阅文献，并未发现对实验动物数目有绝对要求，但在减少的同时，一定要满足统计学要求。统计学上要求一般至少每组有6个可用数据，才有意义。一般小鼠的每组一般不少于10只；一般大鼠每组不少于6只；大动物等级越高，价格越贵，根据情况可适当减少，但一般不能少于4-5只。作为实验设计者，我们不仅仅知其然，也要知其所以然1、为什么要进行样本量估算？科学性要求：使研究设计更加严谨。伦理学...

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细胞传代培养的流程和注意事项

细胞传代培养的流程和注意事项如下：1、当细胞密度达到其生长密度高处时（一般肿瘤细胞为80-100%，原代细胞和干细胞为80-90%，有些细胞为40-50%，熟知所养细胞的生长密度极限），移除旧培养液；2、用PBS洗涤两次（旧培养中的钙离子会抑制胰酶的活性），加入1ml胰酶消化液（以T25培养瓶为例），立即盖好盖子，把培养瓶置于倒置显微镜下观察，如大部分细胞变圆，立即移除胰酶消化液（如大部分细胞漂起，可不移除胰酶消化液），加入5ml预热培养基，用吸管取培养液吹打瓶壁细胞，使其脱...

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TUNEL法检测细胞凋亡原理和经验

TUNEL法检测细胞凋亡原理和经验细胞凋亡中,染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。由此，TUNEL成为了检测DNA片段化（细胞凋亡）的方法。...

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如何使用马弗炉融化金属粉末？

使用马弗炉融化金属粉末是在实验室或工业生产中常见的一种操作，需要遵循安全规程和科学的操作步骤。以下是一个基本的操作流程：准备工作：在开始之前，确保马弗炉已经清洁，并预热至所需的温度。准备金属粉末，确认其化学成分和纯度，确保它适合在马弗炉中融化。准备适当的融化工具，如耐火勺或crucible（坩埚）。装载金属粉末：将金属粉末装入耐火材料制成的坩埚中，注意不要装得太满，以免在融化过程中溢出。放入马弗炉：轻轻地将装有金属粉末的坩埚放入马弗炉内。慢慢升降温度的速度不可太快，以免金属粉...

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